iMuSCs, #10(4)

Figure 4
Skeletal muscle injury induced iMuSCs fulfil several in vivo criteria of pluripotency.
(a) Teratoma formation assay of iMuSCs. Hematoxylin and eosin staining showed differentiated structures of all three germ layers: skeletal muscle (mesoderm, arrows), cartilage (mesoderm, asterisks), blood vessel (mesoderm, asterisk), fat (mesoderm, asterisk), gut epithelium (endoderm, asterisk), neural rosettes (ectoderm, arrow), and neuroepithelium (ectoderm, asterisks) within the same sample. (b) LacZ staining indicated LacZ pre-labelled iMuSC-differentiated structures of adipose, muscle, and neural rosettes contain β-gal+ signals (dark blue dots). Scale bar = 100 μm. (c) Contribution of iMuSCs to mouse embryonic development. Embryos at E14 were analyzed by GFP and LacZ staining, (d) and by qPCR analysis of GFP and LacZ marker gene expression in normally and abnormally developed embryos. (e) The E14 embryos were sectioned and stained with anti-GFP antibody (dark purple). Cells were counterstained with eosin (pink): skin and under-skin, heart, lung, cartilage, gastrointestinal tract, and neural tube. Scale bar = 200 μm. (f) qPCR analysis of GFP and LacZ marker gene expression in the born P21 white pups. Data were pulled together from 6 pups.
 srep17355-f4
 図4
 骨格筋傷害により誘導されたiMuSCsは、in vitroにおいて多能性の基準のいくつかを満たす。
 (a) iMuSCsの奇形腫形成実験。HE染色は、全ての3胚葉層の分化構造を示した:骨格筋(中胚葉、矢印)、軟骨(中胚葉、矢印)、血管(中胚葉、星印)、脂肪(中胚葉、星印)、腸上皮(内胚葉、星印)、神経ロゼッテ(外胚葉、矢印)、神経上皮(外胚葉、矢印)、同一サンプルによる。(b) lacZ染色は、lacZで予めラベルされたたiMuSCにおいて、脂肪組織、筋、神経ロゼッテといった分化構造がβ-gal陽性シグナル(濃紺ドット)を含んでいることを示す。Scale bar = 100 μm。(c)iMuSCsの胚発生に対する関与。E14における胚をGFP及びLacZ染色により解析した。また、(d)定量リアルタイムPCR(qPCR)によって、正常または異常発育した胚におけるGFP及びLacZマーカー遺伝子発現を検討した。(e)E14胚を切片にして、抗GFP抗体(濃紫)で染色した。細胞をエオジン(ピンク)対比染色した:皮膚、皮下組織、心臓、肺、軟骨、胃及び腸、そして神経管。Scale bar = 200 μm。(f)新生P21白色マウスにおけるGFP及びLacZマーカー遺伝子発現に関する量的リアルタイムPCR(qPCR)解析」。データは6匹の新生マウスから得た。
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